植物α-淀粉酶(α-Amylase,α-AL)試劑盒 說明 技術(shù)文章
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植物α-淀粉酶(α-Amylase,α-AL)試劑盒
商品貨號:QS3401
英文名稱:α-amylase Assay Kit
別名:植物α-淀粉酶(α-AL)活性檢測試劑盒
檢測方法:常量法
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價(jià) | 選擇規(guī)格 |
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QS3401-50管/24樣 | 索橋生物 | 50管/24樣 | ¥250.00元 |
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
測定意義:
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉的粘度降低,因此又稱為液化酶。
測定原理:
還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。β-淀粉酶不耐熱,在70℃鈍化15min,從而測定α-淀粉酶活性。
產(chǎn)品說明書
貨號:QS3401 規(guī)格:50 管/24 樣
植物 α-淀粉酶(α-amylase,α-AL)試劑盒說明書 可見分光光度法
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
淀粉酶負(fù)責(zé)水解淀粉,包括 α -淀粉酶和 β -淀粉酶。α -淀粉酶(EC 3.2.1.1)可隨機(jī)地作 用于淀粉中的 α -1,4-糖苷鍵,生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖,同時(shí)使淀粉 的粘度降低,因此又稱為液化酶。
測定原理:
還原糖還原 3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質(zhì)。β -淀粉酶不耐熱,在 70℃鈍化 15min, 從而測定 α -淀粉酶活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:25mL×1 瓶,常溫保存,若有黃色晶體析出,需 90℃加熱溶解后再用;
試劑二:20mL×1 瓶,4℃保存,若有沉淀析出,需 70℃加熱溶解后再用。
粗酶液提?。?/strong>
組織:稱取 0.1~0.2g 樣本(建議稱取約 0.1g 樣本),加 1 mL 蒸餾水勻漿;將勻漿倒入離 心管中,在室溫下放置提取 15min,每隔 5min 振蕩 1 次,使其充分提?。?000g,25℃離心 10min, 吸取上清液并且加蒸餾水定容至 10 mL,搖勻,即為淀粉酶原液。
血清(漿):直接檢測。
操作步驟和加樣表(在 1.5mLEP 管中依次加入下列試劑):
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長到 540 nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 試劑一或試劑二 40℃預(yù)熱 10min
3、測定步驟
試劑(μ L) | 對照管 | 測定管 |
α -淀粉酶原液 | 250 | 250 |
70℃水浴 15min 左右,冷卻 | ||
蒸餾水 | 250 | |
試劑二 | 250 | |
在 40℃恒溫水浴中準(zhǔn)確保溫 5min | ||
試劑一 | 500 | 500 |
混勻,95℃水浴 5min,冷卻, 540nm 處讀取對照管和測定管吸光度,計(jì)算 Δ A=A 測定管-A 對照管。
α-淀粉酶活性計(jì)算:
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定回歸曲線為 y=3.7215x -0.1778; x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),y 為吸光值。
2、α -淀粉酶活性
(1)按照樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義:每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活力單位。
α -淀粉酶活性(mg/min/g 鮮重)=[(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(W×V 樣÷V 樣 總)÷T=1.075×(Δ A+0.1778)÷W
(2)按照蛋白質(zhì)含量計(jì)算
單位定義:每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位。
α -淀粉酶活性(mg/min/mg prot)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷(V 樣×Cpr) ÷T=0.1075×(Δ A+0.1778) ÷Cpr
(3)血清(漿)樣本中 α -淀粉酶活性計(jì)算
單位定義:每 mL 血清(漿)每分鐘催化產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為 1 個(gè)酶活性單位。
α -淀粉酶活性(mg/min/mL)= [(Δ A+0.1778)÷3.7215×V 反總]÷V 樣÷T=0.1075×(Δ A+ 0.1778)
V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.5mL;V 樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.25 mL;V 樣總:提取 液總體積,10 mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,5min。
淀粉系列 | 價(jià)格 | |||
QS3400 | 淀粉含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 260 |
MS3400 | 淀粉含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 500 |
QS3401 | α-淀粉酶測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 250 |
MS3401 | α-淀粉酶測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 480 |
QS3402 | β-淀粉酶測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 460 |
MS3402 | β-淀粉酶測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 900 |
QS3403-50 | ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 2300 |
QS3403-25 | ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 1600 |
MS3403 | ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 4400 |
QS3404-50 | 可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 3200 |
QS3404-25 | 可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 2000 |
MS3404 | 可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 6000 |
QS3405-50 | 結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 3200 |
QS3405-25 | 結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 2000 |
MS3405 | 結(jié)合態(tài)淀粉合成酶(GBSS)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 6000 |
QS3406 | 淀粉分支酶(SBE)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 850 |
MS3406 | 淀粉分支酶(SBE)測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 1600 |