乳酸含量（Lactic Acid ，LA ）試劑盒 說明 技術(shù)文章

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乳酸含量（Lactic Acid ，LA ）試劑盒

商品貨號：QS2206
英文名稱：LA Assay Kit
別名：乳酸含量試劑盒 LA Kit 乳酸含量（LA）試劑盒 乳酸含量（LA）測試盒
檢測方法：常量法

產(chǎn)品詳細介紹

測定意義：

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān)，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

測定原理：

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時使NAD+還原生成NADH和H+，H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原INT生成紅色物質(zhì)，在530nm處有特征吸收峰。

產(chǎn)品說明書

貨號：QS2206               規(guī)格：50 管/24 樣

  乳酸含量（lactic acid ，LA ）試劑盒說明書 可見分光光度法

注意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細胞內(nèi)能 量代謝密切相關(guān)，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標。

測定原理：

乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸，同時使 NAD+還原生成 NADH 和 H +，H +傳遞給 PMS 生成的 PMSH2還原 INT 生成紅色物質(zhì)，在 530nm 處有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器：

天平、研缽、離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制：

提取液：液體 55mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 8mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 12mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1 支，-20℃避光保存。臨用前加入 1.2mL 蒸餾水充分溶解。

試劑四：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 12mL 蒸餾水充分溶解。

試劑五：粉劑×1 支，4℃避光保存。

標準品：液體×1 支，4℃保存。

顯色液：臨用前根據(jù)用量按照提取液（V）：試劑三（V）：試劑四（V）：試劑五（m）=1： 0.3：3：15（mg）的比例充分混勻。

樣本處理：

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入 1mL 提 取液）加入提取液，冰浴勻漿后于 4℃，12000g 離心 10min，取上清測定。

2. 細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細 胞加入 1mL 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）； 于 4℃，12000g 離心 10min，取上清測定。

3. 血清：直接測定。

測定操作：

注意：空白管、標準對照管和標準測定管只需測定一次

計算公式：

1. 按照蛋白含量計算

LA 含量（μ mol/mg prot）=△A 樣÷△A 標×C 標÷ Cpr =2×△A 樣÷△A 標÷ Cpr

2. 按照樣本質(zhì)量計算

LA 含量（μ mol/g）=△A 樣÷△A 標×C 標÷ W =2×△A 樣÷△A 標÷ W

3. 按照細胞數(shù)量計算

LA 含量（μ mol/104 cell）=△A 樣÷△A 標×C 標÷ 細胞數(shù)量 =2×△A 樣÷△A 標÷ 細胞數(shù)量

4. 按照液體體積計算

LA 含量（μ mol/mL）=△A 樣÷△A 標×C 標

=2×△A 樣÷△A 標

C 標：標準品濃度，2mmol/L ；W：樣本質(zhì)量，g/mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL

注意事項：

1. 空白管、標準對照管、標準測定管只需做一次。

2. 若吸光值超過 1.2，請進行適當?shù)南♂尯笤龠M行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。

3. 低檢出限為 1.8μ mol/L。