丙酮酸(Pyruvic Acid PA)含量測定試劑盒 說明 技術(shù)文章
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丙酮酸(Pyruvic Acid PA)含量測定試劑盒
商品貨號:QS2204
英文名稱:Pyruvate (PA)Assay Kit
別名:丙酮酸試劑盒 PA Kit 丙酮酸(PA)試劑盒 丙酮酸(PA)測試盒
檢測方法:常量法
商品貨號: | 商品品牌: | 規(guī)格 | 基本售價 | 選擇規(guī)格 |
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QS2204-50管/48樣 | 50管/48樣 | ¥300.00元 |
產(chǎn)品詳細介紹
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測定意義:
丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。
測定原理:
丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈色。
產(chǎn)品說明書
貨號:QS2204 規(guī)格:50 管/48 樣
丙酮酸(pyruvic acid PA)含量測定試劑盒說明書 可見分光光度法
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
丙酮酸通過乙酰 CoA 連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。
測定原理:
丙酮酸與 2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈色。
自備實驗用品及儀器:
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 50mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶, 4℃避光保存;
試劑二:液體 25mL×1 瓶, 4℃保存。
丙酮酸提?。?/strong>
1、細菌或培養(yǎng)細胞:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超 聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),靜置 30min, 8000g, 25℃離心 10min,取上清待測。
2、組織:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加 入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。
3、血清(漿)樣品:
按照血清(漿)體積(mL):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議取 0.1mL 血清(漿)加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿,靜置 30min, 8000g,25℃離心 10min, 取上清待測。
測定步驟:
1、分光光度計預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 520nm,蒸餾水調(diào)零。
2、取 300μ L 樣本+100μ L 試劑一于 1.5mL EP 管中,混勻,靜置 2min,加入 500μ L 試劑二, 混勻,于 520nm 波長處測定管吸光值 A。
丙酮酸含量計算:
1、標準條件下測定回歸方程為 y = 0.0466x + 0.0675; x 為丙酮酸含量(µg/mL),y 為吸光值。
2、按照血清(漿)體積計算
丙酮酸含量(μ g/mL)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V3×V1÷V2)=214.6×(A-0.0675)
3、按照蛋白濃度計算
丙酮酸含量(μ g/mg prot)=[(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(V1×Cpr)=21.46×(A-0.0675) ÷Cpr
4、按照樣品質(zhì)量計算
丙酮酸含量(µg/g 鮮重)= [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷(W ×V1÷V2)=21.46×(A-0.0675)÷W
3、按照細菌或細胞密度計算
丙酮酸含量( μ g/104 cell ) = [(A-0.0675)÷0.0466×V1]÷ ( 500×V1÷V2 ) =0.043×(A-0.0675)
V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.3mL;V2:加入提取液體積,1 mL;V3:加入血清(漿)體 積,0.1 mL; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。
注意:低檢測限為 1μ g/mL 或 1μ g/g 鮮重或 10ng/mg prot
三羧酸循環(huán)系列 | 單價 | |||
QS2100 | α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 720 |
MS2100 | α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDH)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1400 |
QS2101 | 檸檬酸(CA)含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 350 |
MS2101 | 檸檬酸(CA)含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 690 |
QS2102 | 琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 260 |
MS2102 | 琥珀酸脫氫酶(SDH)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 500 |
QS2103 | 丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 720 |
MS2103 | 丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1400 |
QS2104 | 線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 530 |
MS2104 | 線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 1000 |
QS2106-50 | 乙酰輔酶A測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 3200 |
QS2106-25 | 乙酰輔酶A測試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 2000 |
MS2106 | 乙酰輔酶A測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 5800 |
QS2107-50 | 線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒 | 紫外分光光度法 | 50管/48樣 | 2500 |
QS2107-25 | 線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒 | 紫外分光光度法 | 25管/24樣 | 1500 |
MS2107 | 線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 4700 |
QS2206 | 乳酸含量(LA)測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/24樣 | 650 |
MS2206 | 乳酸含量(LA)測試盒 | 微量法 | 100管/48樣 | 1280 |
QS2204 | 丙酮酸(PA)含量測試盒 | 可見分光光度法 | 50管/48樣 | 300 |
MS2204 | 丙酮酸(PA)含量測試盒 | 微量法 | 100管/96樣 | 580 |